“新”熒光解決“真”問題

病原真菌的診斷一直是臨床檢查中的一項難題,由于其獨特的細胞結(jié)構(gòu),并且早期感染無明顯癥狀,導(dǎo)致其在檢驗診斷中有一定困難，而由真菌感染所導(dǎo)致的疾病死亡率也逐漸上升，如何對病原真菌進行快速檢測對病原真菌感染的治療有著重要意義。

目前真菌的檢測方法有：涂片鏡檢、真菌培養(yǎng)、分子生物學、特異性標志物和抗體檢測，而培養(yǎng)法是真菌鑒定分類的金標準，但其培養(yǎng)周期長、診斷滯后，對實驗室人員有特殊要求。

近期，江西省胸科醫(yī)院病理科引進了新近發(fā)展的真菌免疫熒光染色診斷項目。它是一種新型的染色技術(shù)，其染色液中的熒光增白劑是一種熒光染料，與多種植物以及真菌細胞壁的幾丁質(zhì)和纖維素均具有較強的親和力，在特定的紫外光下(350~400 nm)能夠發(fā)出亮藍色熒光，通過熒光顯微鏡觀察其形態(tài)可達到檢測真菌的目的。

真菌熒光染色診斷的優(yōu)勢在于，真菌結(jié)構(gòu)在熒光顯微鏡下發(fā)出特殊的熒光而易于尋找、辨認，縮短了標本鏡檢時間，達到快速診斷的目的。有文獻報道熒光染色可使標本鏡檢時間縮短到30-60秒，10%KOH濕片平均鏡檢時間為3分鐘。

最近病理科接到了一例手術(shù)病例，該病例快速診斷就受益于此項目的開展。患者于12月16日行右上肺部分切除術(shù)，并行術(shù)中快速冰凍檢查，標本送至病理科，經(jīng)過標本核對--登記--記錄--取材--切片--染色--診斷等常規(guī)操作程序，科主任劉翼軍鏡下觀察診斷考慮肉芽腫性炎，部分組織細胞內(nèi)可見少量孢子體，考慮真菌感染。為明確診斷，劉主任立即下達醫(yī)囑，加做免疫熒光真菌染色，因冰凍診斷具時限性(30分鐘內(nèi)需出具報告)，技術(shù)組組長農(nóng)雪萍迅速進行組織切片及免疫真菌熒光染色，在2分鐘內(nèi)制作出組織免疫熒光片。劉主任在熒光顯微鏡下即刻診斷，真菌孢子體在熒光顯微鏡下栩栩如生，病理最終診斷呼之欲出：真菌感染性肉芽腫性炎，符合新型隱球菌感染，快速、準確地為臨床提供了明確的診斷。

病理是一門形態(tài)科學。隨著科學技術(shù)的不斷發(fā)展，病理醫(yī)生可以通過多種手段去證實病理形態(tài)，這正是病理學科的進步——讓形態(tài)指引診斷方向，用證據(jù)來明確診斷。北京協(xié)和醫(yī)院病理科鐘定榮教授說：“這是進步的表現(xiàn)，病理診斷的手段越多，診斷的準確性就會越高。”